鼠疫IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
鼠疫IgM抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
使 用 说 明（96T/48T） [原理]
科研试剂编辑：{深圳市恒昊生物科技有限公司}
本试剂盒采用亲和素-生物素化鼠疫纯化抗原预 包被板 ELISA 原理，检测人血清中存在的鼠疫 IgG 抗体，并配以酶标记抗人 IgG 单克隆抗体作为标记物抗体免疫 。 加入底物 TMB 显色后终止反应，在 450nm波长测各 孔 O.D 值 ， O.D 值 的 大 小 与 待 检 抗 体 含 量 成 正 比。生物素系统（biotin-avidin system）的稳固级联放 大作用，使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提 高是本试剂含有的独特优点。
[用途]
本试剂盒用于定性检测人血清中的鼠疫 IgG 抗 体，用于鼠疫菌苗接种后效果监测和流行病学调研抗体免疫 。
[适应范围]
疫苗接种后效能监测抗体免疫 。
流行病学调研和既往感染的诊断抗体免疫 。
[贮存条件及有效期]
试剂置 2~8℃密封保存，避免冻结抗体免疫 。有效期 12 个 月。
[适用仪器]
各类国产和进口酶标仪均可使用，检测波长 450nm抗体免疫 。 [试剂盒组成]
1 、生物素化抗原预包被板 1 块（8X12/4X12）
2 、阴性对照 1 瓶（直接使用）
3 、阳性对照 1 瓶（直接使用）
4 、标本稀释液
1 瓶（22/11 ml 抗体免疫 ，直接使用）
5 、酶结合物 1 瓶（12/5ml 抗体免疫 ，直接使用）
6 、浓缩洗涤液（30X）
1 瓶（20/10ml抗体免疫 ，加蒸馏水 1：30 稀释使用）
7 、显色剂 A 、B 各 1 瓶（5/3ml）
8 、终止液（2M H2SO4 ） 1 瓶（5/3ml）
9 、说明书 1 份 [操作步骤]
1 、将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封抗体免疫 。
2 、标本稀释：用标本稀释液以 1 ： 101（2ul 标本 —200ul 标本稀释液）稀释标本抗体免疫 。于反应板中加 已稀释待检标本及阴阳性对照（100ul）各一孔， 设空白对照一孔（加 100ul 标本稀释液）轻拍混 匀。
3 、37℃温育30 分钟抗体免疫 。甩去孔内液体，用洗涤液洗 板 3 次并在吸水纸上拍干。
4 、加酶结合物：每孔 2 滴，混匀后置 37℃温育 3 分钟抗体免疫 。同上法洗涤 3 次并拍干。
5、显色：每孔加显色剂 A、B 各一滴，轻拍混匀（或 震荡器混匀）后置 37℃10 分钟抗体免疫 。
[结果判断]
1 ． 目测：在白色背景下观察各孔显色情况，蓝色者 为阳性，无色者为阴性抗体免疫 。
2 ． 酶标仪测定：每孔加终止液一滴，混匀后在 450nm 下测定各孔 O.D 值抗体免疫 。
1 S/N=标本 O.D 值/阴性对照 O.D 值抗体免疫 。
2 S/N≥2. 1 为阳性；
3 S/N＜2. 1 为阴性
4 阴性对照(NC)小于 0.10 时以 0. 10 计算, 大于
0. 1 小于 0.21 时以实际 O.D 值计算 ;若大于
0.21 时, 实验可能出现了较大误差, 需重复实 验抗体免疫 。