抗滋养层细胞抗体检测试剂盒(酶联免疫法):抗体免疫

抗滋养层细胞抗体检测试剂盒(酶联免疫法)

作者-深圳市恒昊生物科技有限公司

本试剂盒采用滋养层细胞Ta纯化抗原预包被板 ELISA 间接法原理,定性检测人血清中存在的 Ta-IgG 抗体,并配以酶标记 SPA 作为标记物抗体免疫 。加入 底物 TMB 显色后终止反应,在 450nm 波长测各孔 O.D 值,O.D 值的大小与待检抗体含量成正比。

【检验方法】 1、 将试剂盒从冷藏环境中取出平衡至室温(15 分 钟),取出预包被板并拆封抗体免疫 。 2、 将浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水按 1:30 比例 稀释,混匀后待用。 3、 标本稀释及加样:将待检标本用标本稀释液 1: 21 稀释(标本 5ul---标本稀释液 100ul),于反应 板中加入 100ul 已稀释待检标本。设阴阳性对照 (100ul/孔,不稀释)各一孔,设空白对照一孔 (加 100ul 标本稀释液),轻拍混匀。

4、 孵育:37℃温育 30 分钟抗体免疫 。甩去孔内液体,用洗 涤液连续洗板 3 次,每次停留 30 秒后甩去孔内 液体,在吸水纸上拍干。 5、 加酶结合物:每孔 2 滴(或 100ul),混匀后置 37℃温育 30 分钟。同上法洗涤 3 次并拍干。 6、 显色:每孔加显色剂 A、B 各一滴(或各 50ul), 轻拍混匀(或震荡器混匀)后置 37℃温育 10 分钟。

1、 目测:在白色背景下观察各孔显色情况,蓝色者 为阳性,无色者为阴性抗体免疫

2、 酶标仪测定:每孔加终止液一滴(或各 50ul), 混匀后在 450nm 波长下以空白孔调零后测定各 孔 O.D 值抗体免疫 。 1 S/N=标本 O.D 值/阴性对照 O.D 值。 2 S/N≥2.1 为阳性; 3 S/N<2.1 为阴性。 4 阴性对照小于 0.10 时以 0.10 计3、 肉眼可见蓝色,但酶标仪测出 O.D 值小于 0.21 者,为可疑标本,应择日重测。对实验结果可能 产生影响的因素见“注意事项”内容。 4、 阴性对照 O.D 值正常范围应<0.21,阳性对照≥ 0.40 以上实验结果成立,否则实验可能产生偏 差,需重新试验。

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